របៀបដែល endonuce នេះកើតឡើង
តើអ្នកដឹងពីអង់ស៊ីមរឹតបន្តឹងប៉ុន្មាន? ទទួលបានការយល់ដឹងកាន់តែប្រសើរអំពីអ្វីដែលពួកគេធ្វើហើយហេតុអ្វីបានជាពួកគេសំខាន់ណាស់ជាមួយនឹងការពិនិត្យឡើងវិញនេះ។
កំណត់អង់ស៊ីមកំហិត
ការដាក់កម្រិត endonucleases គឺជា អង់ស៊ីម ដែលកាត់បន្ថយម៉ូលេគុលឌីអិនអេ។ អង់ស៊ីមនិមួយៗទទួលស្គាល់នូវលំដាប់លំដោយនៃនុយក្លេអ៊ែរតែមួយគត់នៅក្នុងខ្សែអេឌីអិន។ លំដាប់ដូចនេះជាធម្មតាមានប្រវែងវែងពី 4 ទៅ 6 គូ។ លំដាប់គឺ palindromic នៅក្នុងនោះថាខ្សែរ ADN បំពេញបន្ថែមមានលំដាប់ដូចគ្នាតែនៅក្នុងទិសបញ្ច្រាសនេះ។
នៅក្នុងពាក្យផ្សេងទៀតទាំងពីរ strands នៃ DNA ត្រូវបានកាត់នៅក្នុងទីតាំងដូចគ្នា។
ដែលរកឃើញអង់ស៊ីមទាំងនេះ
អង់ស៊ីមកំហិតត្រូវបានគេរកឃើញនៅក្នុងបាក់តេរីផ្សេងៗគ្នាជាច្រើនដែលតួនាទីជីវសាស្ត្ររបស់ពួកគេគឺចូលរួមនៅក្នុងការការពារកោសិកា។ អង់ស៊ីមទាំងនេះ "ដាក់កម្រិត" DNA (ឧ។ វីរុស) ដែលចូលក្នុងកោសិកាដោយបំផ្លាញវា។ កោសិកាម៉ាស៊ីនមានប្រព័ន្ធកែប្រែការរឹតត្បិតដែលមេតាប៊ីនឌីអិនអេរបស់ខ្លួនផ្ទាល់នៅតាមតំបន់ជាក់លាក់សម្រាប់អង់ស៊ីមរឹតបណ្តឹងរបស់វារៀងៗខ្លួនដោយការពារវាពីការបាត់បង់។ អង់ស៊ីមដែលស្គាល់ ជាង 800 ត្រូវ បានគេរកឃើញដែលស្គាល់លំដាប់ជាង nucleotide ជាង 100 ។
ប្រើក្នុងជីវបច្ចេកវិទ្យា
អង់ស៊ីមរឹតត្បិតត្រូវបានប្រើក្នុងបច្ចេកវិទ្យាជីវសាស្រ្តដើម្បីកាត់បន្ថយឌីអេនអេក្នុងខ្សែកតូចៗដើម្បីសិក្សាពីភាពខុសប្លែកគ្នារវាងបំណែកនៃបំណែកក្នុងចំនោមបុគ្គល (Restriction Fragment Length Polymorphism - RFLP) ។ ពួកវាត្រូវបានគេប្រើសម្រាប់ការក្លូនហ្សែនផងដែរ។
បច្ចេកទេស RFLP ត្រូវបានគេប្រើដើម្បីកំណត់ថាបុគ្គលឬក្រុមបុគ្គលមានភាពខុសប្លែកគ្នាខុសគ្នានៅក្នុងលំដាប់ហ្សែននិងការដាក់កម្រិតនូវលំនាំដាច់ពីគ្នានៅតាមតំបន់ជាក់លាក់នៃហ្សែន។
ចំនេះដឹងនៃតំបន់តែមួយគត់ទាំងនេះគឺជាមូលដ្ឋានសម្រាប់ DNA fingerprinting នេះ ។ វិធីសាស្រ្តនីមួយ ៗ ពឹងផ្អែកលើការប្រើប្រាស់ ជែលអេឡិចត្រូស្យូហ្សែល សម្រាប់ការបំបែកបំណែង DNA ។ TBE buffer ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយមូលដ្ឋាន Tris, អាស៊ីត boric និង EDTA ត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ការប្រើ អេឡិចត្រូម៉ាញ៉េស្យូ ហ្សែលដើម្បីពិនិត្យផលិតផលឌីអេនអេ។
ប្រភេទអង់ស៊ីមដែលដាក់កម្រិត
អង់ស៊ីមមានកម្រិតនៃប្រភេទបីខុសៗគ្នា។ ប្រភេទ I កាត់ DNA នៅទីតាំងចៃដន្យរហូតដល់ 1000 ឬច្រើនជាងនេះជាមូលដ្ឋានគូពីកន្លែងទទួលស្គាល់។ ប្រភេទ III បានកាត់បន្ថយប្រមាណ 25 គល់មូលដ្ឋានពីកន្លែង។ ប្រភេទ I និង III ត្រូវការ ATP និងអាចជាអង់ហ្ស៊ីមដ៏ធំដែលមានអនុផ្នែកជាច្រើន។ អង់ស៊ីមប្រភេទទី 2 ដែលត្រូវបានគេប្រើប្រាស់យ៉ាងច្រើនលើសលប់នៅក្នុងបច្ចេកវិទ្យាជីវសាស្រ្តបានកាត់បន្ថយឌីអេនអេក្នុងលំដាប់ដែលត្រូវបានទទួលស្គាល់ដោយមិនត្រូវការ ATP និងមានទំហំតូចនិងងាយស្រួលជាង។
អង់ហ្ស៊ីមប្រភេទទី 2 ត្រូវបានគេដាក់ឈ្មោះតាមប្រភេទបាក់តេរីដែលពួកវាត្រូវបានញែកដាច់ពីគ្នា។ ឧទាហរណ៏អង់ស៊ីម អេកកូ ត្រូវបានញែកចេញពី អេអ៊ីស៊ី ។ សាធារណជនភាគច្រើនបានដឹងអំពីជំងឺឆ្លង E. coli នៅក្នុងម្ហូបអាហារ។
ប្រភេទអង់ហ្ស៊ីមប្រភេទ II អាចបង្កើតប្រភេទពីរខុសគ្នាអាស្រ័យលើថាតើពួកវាកាត់ខ្សែទាំងពីរនៅចំកណ្តាលនៃលំដាប់ទទួលស្គាល់ឬក៏ខ្សែនីមួយៗជិតគ្នាទៅនឹងចុងបញ្ចប់នៃលំដាប់ទទួលស្គាល់។
ការកាត់លើកមុននឹងបង្កើត "ចុងរិល" ដោយគ្មានស្នូលនុយក្លេអ៊ែរទេ។ ក្រោយៗទៀតបង្កើត "ស្អិត" ឬ "ស្អិតរមួត" ដោយសារចុងបញ្ចប់នៃបំណែកឌីអិនអេនីមួយៗមានស្នូលឆ័ត្រដែលបំពេញបន្ថែមដល់បំណែកដទៃទៀត។ ទាំងពីរមានប្រយោជន៍ក្នុងហ្សែនម៉ូលេគុលសម្រាប់ធ្វើ DNA និងប្រូតេអ៊ីន recombinant ។
ទម្រង់ឌីអេនអេនេះលេចចេញដោយសារតែវាត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយតំណភ្ជាប់ (ភ្ជាប់គ្នា) នៃខ្សែពីរឬច្រើនខុសគ្នាដែលមិនត្រូវបានតភ្ជាប់ពីដើមមក។